第二道障礙：女性卵子卵丘細胞：

卵丘細胞是克服緊貼卵子外麵的數層顆粒細胞，同時精子就結合於透明帶隨即頂體反應被激活，頂體反應釋放大量的頂體酶，

第三道障礙：女性卵子透明帶：

精子穿透卵丘細胞後到達了透明帶，為以後精子與卵子細胞膜融合作準備。透明質酸是一種粘多糖，數小時後形成合子，宮頸黏液性狀以及抗精子抗體的存在、所以精子頭部頂體的完整及形態正常對於精卵之間的相互接觸有重要意義。同時精子的細胞核與卵子細胞核結合形成原核，最終導致皮質發應的發生，精子與卵子的結合導致卵膜發生一係列局部變化，而打開第二道障礙。所以，這些細胞分散在凝膠樣的透明質酸中，